Resultado Proyecto
Desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico basados en biomarcadores bovinos (proteinas) para diagnóstico temprano de la paratuberculosis bovina
Referencia: RTI2018-094192-R-C22. Organismo financiador: Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (MCIU), Agencia Estatal de Investigación (AEI). Cofinanciado por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER). Importe: 127.050 €. Duración: 2019-2021.
Equipo investigador
Rosa Casais Goyos. SERIDA
Ramón A. Juste Jordan. SERIDA
Isabel Márquez Llano-Ponte SERIDA
Entidades Colaboradoras
Cristina Blanco Vázquez. SERIDA
Natalia Iglesias Besteiro. SERIDA
Javier Fernández Amado. SERIDA
Tania Rubio. Universidad de Oviedo
Justificación
La paratuberculosis bovina (PTB) es una enteropatía crónica muy contagiosa que ocasiona graves pérdidas económicas en las explotaciones bovinas. En Asturias en 2017, el 25% (311/1212) de las explotaciones y el 1.9% (620/35.387) de los animales analizados mediante ELISA de anticuerpos frente a MAP fueron positivas. La PTB es una enfermedad de curso predominantemente subclínico, los terneros / animales una vez infectados permanecen asintomáticos durante un largo periodo de tiempo (2-5 años), durante el cual están eliminando MAP en heces, calostro y leche, transmitiendo la enfermedad a otras vacas del rebaño. El control de la PTB a nivel de rebaño se realiza mediante la identificación de los animales infectados y su retirada de la explotación para eliminar las fuentes de infección. Sin embargo, la eficiencia de los programas de control basados en el saneamiento está fuertemente condicionada por la sensibilidad de las técnicas utilizadas para identificar los animales que se encuentran en la fase subclínica de la enfermedad. La detección de estos animales es complicada pues las técnicas actuales de diagnóstico (cultivo y PCR fecal, ELISA IDEXX, prueba del Ɣ-interferón) no son suficientemente sensibles.
Objetivo
Por ello, el objetivo principal de este proyecto es desarrollar nuevos métodos de diagnóstico para la detección precoz de la PTB bovina utilizando un nuevo abordaje que consiste en la detección en suero de biomarcadores proteicos específicos de las distintas formas histopatológicas en las que se manifiesta la PTB.
Los objetivos concretos del proyecto son los siguientes: 1) Pre-validación de ELISAs basados en la detección de biomarcadores bovinos previamente identificados (RTA2014-0009-C02-00) mediante el análisis transcriptómico por RNAseq de sangre periférica de vacas frisonas con lesiones (focales y difusas) y vacas control sin lesiones; 2) Desarrollo de un ELISA de diseño propio para la detección/cuantificación de los biomarcadores seleccionados; 3) Validación a gran escala del ELISA desarrollado; 4) Identificación de nuevos biomarcadores mediante análisis proteómico de muestras de suero de animales infectados con MAP; y 5) Estudio del potencial terapéutico de los biomarcadores seleccionados en un modelo animal de infección con MAP en conejo.