Equipo investigador
Rosa Casais Goyos SERIDA
José Miguel Prieto Martín SERIDA
Pablo González Quirós BIOGESTION
Equipo técnico
Paloma Solano Sobrado SERIDA
El objetivo de este proyecto es el desarrollo, mediante técnicas de Biología Molecular, de un método de diagnóstico serológico (ELISA) para la detección de animales infectados con el ácaro Sarcoptes scabiei, el agente causal de la sarna sarcóptica.
El escrutinio de una genoteca de cDNA de S. scabiei var. hominis con el suero de un animal enfermo permitió la identificación de 11 clones de cDNA inmunoreactivos. El análisis de su secuencia nucleotídica condujo a la selección de uno de estos clones (Ssλ20), ya que contenía el fragmento de cDNA de mayor tamaño. El cDNA Ssλ20 se expresó como proteína de fusión con la Glutatión S-transferasa (GST) en Escherichia coli y se purificó. Posteriormente, se estudió su potencial como antígeno en el inmunodiagnóstico de la enfermedad mediante la técnica ELISA, comprobándose que Ssλ20 permite diferenciar muy eficazmente entre sueros control positivos y negativos. Además, se comprobó que el ELISA era aplicable a varias especies silvestres (rebeco, ciervo, corzo y zorro) y domésticas (cabra).
La validación del test ELISA desarrollado se realizó utilizando un panel de 50 sueros de ciervos: 42 procedentes de una zona libre de sarna (Las Lomas, Cádiz) y ocho procedentes de animales con sarna confirmada mediante la observación directa de lesiones, el aislamiento del ácaro a partir de muestras de piel e inmunohistoquímica. Este panel de sueros nos permitió establecer el punto de corte del ELISA para esta especie en 0,46. Asimismo, el test se caracteriza por una especificidad del 97 % y una sensibilidad del 75 %. Además, el ELISA no da reacciones cruzadas con sueros de animales infectados con garrapatas, un artrópodo que a menudo aparece en animales sarnosos.
En los últimos años ha habido un número creciente de ciervos con sarna en el Principado de Asturias. Ante la amenaza de una posible epidemia de la enfermedad en esta especie se hizo un estudio de 418 muestras de ciervos recogidas entre los años 2002 y 2006. Los resultados obtenidos revelaron que las muestras procedentes de reservas de caza situadas en concejos sin historia previa de casos de sarna (83) eran todas seronegativas, mientras que de las muestras procedentes de reservas de caza con casos de sarna (327) sólo cuatro eran seropositivas. Estos resultados parecen indicar que no estamos ante una nueva epidemia de sarna.