Resultado Proyecto
Estudio de la respuesta a sequía de P. Pinaster Ait. utilizando aproximaciones genómicas y ecofisiológicas (HIDROFOR)
Referencia: AGL 2006-03242/FOR. Organismo financiador: Ministerio de Educación y Ciencia. Importe: 201.000 €. Duración: 2006-2009.
Equipo investigador
Alvaro Soto de Viana ETSIM (Madrid)
Maite Cervera Goy CIFOR (INIA)
Carmen Collada Collada ETSIM (Madrid)
Juan Pedro Majada Guijo SERIDA
Isabel Feito Díaz SERIDA
Tania Velasco Conde INIA (Becaria)
Avance de resultados
El objetivo consiste en identificar y caracterizar los genes inducidos por el estrés hídrico y estudiar su expresión y correlación con la respuesta fisiológica.
Selección del material de estudio y desarrollo de sistemas experimentales.
Se analizó el comportamiento frente a sequía de distintas poblaciones de Pinus pinaster Ait. que representan el área de distribución de la especie. Este estudio, permitió seleccionar individuos de la población de Oria para la construcción de la genoteca diferencial frente a estrés hídrico. Esta población, que tiene que soportar severa sequía estacional, desarrolla una respuesta que combina un buen ajuste osmótico con una estrategia de mayor inversión en el desarrollo de biomasa radical frente a este estrés. De este modo, puede presumirse la existencia de mecanismos inducibles de respuesta a la sequía, susceptibles de ser identificados. Con objeto de asegurar la detección del mayor número de genes y variantes presentes en la procedencia, se seleccionaron 10 genotipos. Mediante ensayos preliminares, se han establecido los protocolos para los experimentos de estrés hídrico en condiciones controladas en cultivo hidropónico mediante tratamiento con polietilenglicol (PEG).
Desarrollo del experimento de estrés para la construcción de una genoteca sustractiva.
El material de P. pinaster seleccionado (estaquillas de 10 meses), mantenido en cultivo hidropónico, se sometió secuencialmente a tratamiento de estrés, en cuatro etapas de cuatro horas, hasta alcanzar los -1.6 MPa finales. La recogida de material para la posterior construcción de la genoteca se llevó a cabo separando acículas, tallo y raíz, una hora después de cada cambio de solución, así como al cabo de 12 y 24 horas a -1.6 MPa.
Izquierda. Esquejes con 5 cm de largo a los dos meses de edad después de la poda apical de la planta madre. Derecha. Planta madre con 8 meses de edad y presentando esquejes ortotrópicos con dominancia apical, dos meses después de la poda y aptos para ser enraizado