Equipo investigador
Rosa Casais Goyos SERIDA
José Miguel Prieto Martín SERIDA
Antonio José Sanz Fernández INGENASA
Carmen Vela Olmo INGENASA
Equipo técnico
Paloma Solano Sobrado SERIDA
Ana Camuñas Talavera INGENASA
La sarna sarcóptica es una ectoparasitosis de distribución mundial producida por el ácaro Sarcoptes scabiei. A pesar de la disponibilidad de acaricidas eficaces para tratar esta infestación de forma eficaz, la enfermedad persiste en poblaciones humanas y animales.
Durante la primera anualidad del presente proyecto se ha abordado la adaptación del ELISA indirecto, basado en el antígeno recombinante Ssλ20∆B3, desarrollado en el proyecto anterior, al diagnóstico de la sarna sarcóptica en especies domésticas, concretamente en el cerdo y el conejo.
En primer lugar, se han establecido las condiciones óptimas del ensayo (dilución de suero, tipo y dilución del conjugado y tipo de sustrato) utilizando sueros de referencia positivos y negativos procedentes de infecciones experimentales realizadas en ambas especies.
En las condiciones preseleccionadas, se ha investigado el punto de corte del ELISA para cada especie. Para ello, en el caso del conejo, se ha utilizado un panel de 21 sueros de conejos domésticos sanos y, para el cerdo, un panel de 23 sueros procedentes de animales de experimentación y de granjas libres de sarna. Así, para el conejo, el punto de corte del ELISA ha quedado establecido en un porcentaje de DO450nm relativa del 3 %, siendo el 14,2 % para el cerdo. Basándonos en estos puntos de corte, se han estudiado los siguientes parámetros de validación del método de diagnóstico: sensibilidad y especificidad analítica (SA y EA), sensibilidad y especificidad diagnósticas (SD y ED), eficiencia, repetibilidad y reproducibilidad. En la tabla 1 se resumen los resultados obtenidos.
Tabla 1. Parámetros de validación del ensayo ELISA adaptado.
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Parámetro |
Especie |
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Cerdo |
Conejo |
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SA |
Dilución 1/160 C+ |
Dilución 1/320 C+ |
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EA |
No reacciona con Dermatophagoides pternonyssinus y A. siro. |
Reacciona con Psoroptes cuniculi |
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SD |
66,60 % |
*100,00 % |
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ES |
95,65 % |
100,00 % |
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Eficiencia |
89,60 % |
100 % |
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Repetibilidad |
12,40 % |
6,20 % |
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Reproducibilidad |
15,43 % |
8,14 % |
| C+, control de referencia positivo; * La sensibilidad diagnóstica se calculó utilizando sueros procedentes de conejos infectados experimentalmente tomados a partir de la 5ª semana post-infestación. | ||
En cuanto al desarrollo de un método de diagnóstico “multiespecie”, basado en el uso de anticuerpos monoclonales (AcM) específicos frente a Sarcoptes, se ha obtenido un AcM denominado 31F2 y, además, se están clonando y estabilizando otros 6 AcM. Su potencial para el desarrollo del ensayo “multiespecie” será evaluado en el próximo año.