Resultado Proyecto

Utilización de semen sexado para la mejora de las biotecnologías reproductivas in vitro en ganado vacuno

Referencia: RTA2008-00082-00-00. Organismo financiador: Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria. Importe: 71.640 €. Duración: 2008-2011.

Equipo investigador

Carmen Díez Monforte. SERIDA
Enrique Gómez Piñeiro. SERIDA
José Néstor Caamaño Gualdoni. SERIDA
Marta Muñoz Llamosas. SERIDA
Fernando Vicente Mainar. SERIDA
Alfredo Castro. Sexing Technologies
David Cran. Sexing Technologies
Richard Lenz. Sexing Technologies

Equipo técnico

Susana Carrocera Costa. SERIDA

Entidades Colaboradoras

Luis José Royo Martín. SERIDA
Alfonso Gutiérrez-Adán. INIA
Sexing Technologies, USA

Avance de resultados

Los trabajos iniciales se centraron en el ensayo de las condiciones óptimas de la técnica de fecundación in vitro (FIV), y en el testaje de las dosis seminales proporcionadas por Sexing Technologies. Los resultados obtenidos nos permitieron concluir que, dada la escasa concentración espermática de las pajuelas, los protocolos de separación por gradientes son de elección en el caso de la utilización de semen sexado, aunque son menos repetibles que la separación por swim-up. Sólo dos de los cinco toros testados permitieron la obtención de tasas de blastocistos en día 8 compatibles con el desarrollo de los experimentos previstos, lo que confirma la existencia de un efecto individual en la fertilidad del semen bovino in vitro.

Puesta a punto de protocolos de sexaje por PCR de embriones bovinos y estandarización de la técnica de PCR

La utilización de semen sexado en FIV requiere la posterior verificación del sexo de los embriones, con el fin de confirmar la eficacia del proceso de separación de los espermatozoides por citometría de flujo. Para ello, se dispone de una técnica de sexaje por PCR. Los resultados se presentan en la tabla 1.

Tabla 1. Resultados de sexaje del toro control (completo) y del conjunto de los toros sexados

 Establecimiento de un sistema de cultivo in vitro adaptado a la producción de embriones de sexo conocido.

Los resultados obtenidos hasta la fecha permiten afirmar que medio de cultivo no parece afectar el desarrollo de los embriones macho o hembra, aunque sí se han detectado efectos del medio empleado sobre el desarrollo embrionario, con semen completo no separado.