Resultado Proyecto

Identificación, aislamiento y análisis funcional de factores promotores del crecimiento inducidos por embriones en el fluido uterino bovino

Referencia: AGL2012-37772. Organismo financiador: Ministerio de Economía y Competitividad, Subprograma de proyectos de investigación fundamental no orientada. Cofinanciado por el Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER). Importe: 140.000 €. Duración: 2012-2015.

Equipo investigador

Marta Muñoz Llamosas. SERIDA
Enrique Gómez Piñeiro. SERIDA
José Nestor Caamaño Gualdoni. SERIDA
Susana Carrocera Costa. SERIDA
Eva Correia Álvarez. SERIDA
Marta Alonso Guervós. Universidad de Oviedo
Olivier Sandra. INRA, Jouy-en-Josas, Francia
Veronique Duranthon. INRA, Jouy-en-Josas, Francia
Fernando Corrales. CIMA, Unioversidad de Navarra

Equipo técnico

David Martín. SERIDA

Avance de resultados

La identificación y caracterización funcional de factores promotores del crecimiento (GFs) embrionario bovino durante las etapas tempranas del desarrollo, puede mejorar el rendimiento de las técnicas de producción de embriones in vitro creando condiciones de cultivo similares al ambiente uterino.
Durante el 2º año de este proyecto, se ha analizado la expresión de varios GFs en muestras de fluido uterino bovino mediante Multiple Reaction Monitoring (MRM) y WB (Hito 1). Además, tras analizar el patrón de expresión de uno de los GFs de interés, artemina, en el endometrio y embriones bovinos (Hito 2), se establecido un protocolo para su aislamiento mediante inmunoprecipitación (IP) (Hito 3) y posterior ensayo funcional. Por último se han producido las muestras necesarias de cultivos in vitro de células endometriales (CCE) para reproducir los resultados obtenidos in vivo (Hito 4).

Hitos finalizados (F) o en desarrollo (D) durante año 2014

1- Análisis de las muestras de fluido uterino recogidas durante el primer año de proyecto; detección de 5 de los 8 GFs examinados (F).
2- Establecimiento del patrón de expresión de GFs de interés en endometrio (immunocitoquímica-ICQ y WB) y embriones (RT-PCR e ICQ) para establecer su origen (D).
3- Elaboración de un anticuerpo policlonal para aislar artemina en endometrio (F) mediante IP y realizar estudios funcionales.
4- Producción de las muestras de cultivos de células endometriales endometriales necesarias (N= 57 x 4) para reproducir in vitro los resultados obtenidos in vivo en el útero bovino en presencia de embriones (F).